浏览数量: 100 作者: 英泰离心机 发布时间: 2020-09-13 来源: 英泰运营部
碳源是工程菌生长和产物合成的主要能源和前体来源之一,它通过糖酵解途径、三羧酸循环和呼吸链生成ATP及合成氨基酸、核苷酸等的前体。基因工程菌培养中常用的碳源为葡萄糖、甘油、乳糖、果糖、甘露糖等。其中葡萄糖是最易利用的碳源,而且葡萄糖价格低廉,因而是大多数工程菌培养首选的碳源。但是基因工程大肠杆菌在葡萄糖充足的培养基中生长时、往往会产生代谢副产物乙酸,乙酸积累到一定浓度就会抑制菌体的生长和产物的合成。另外在工程菌诱导表达阶段,对使用lac、Arab等糖类启动子及其杂合启动子如tac等的工程菌,一定浓度的葡萄
糖的存在会引起葡萄糖效应,阻遏目的基因的转录。解决上述问题的方法有:
①采用较难利用的碳源,如甘露糖,代替葡萄糖,但这些碳源往往比葡萄糖昂贵;
②控制培养基中的葡萄糖浓度极低,并采用缓慢流加葡萄糖的措施使葡萄糖浓度维持在这种状态,使工程菌以较低的比生长速率(通常是0.1~0.2h的-1次方)生长。